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本课程起止时间为:2020-02-17到2020-03-15
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【作业】第五章 植物组织培养的基本原理 单元作业 第2-5章 植物组织培养的基本原理
1、 问题:以茎尖外植体为例,简要说明外植体处理和无菌系建立的方法。
评分规则: 【 外植体的准备:选取幼嫩的顶芽或侧芽外植体(带有少量幼叶和叶原基),去除老叶,流水冲洗后备用;
表面灭菌处理:在超净工作台上将幼嫩的茎尖外植体放入灭菌容器内,先用75%的乙醇处理不超过30s,再用1%的次氯酸钠溶液浸泡处理一定时间(5-20min),不同植物种类和不同幼嫩程度处理时间不同,处理后倒掉次氯酸钠,再用无菌水冲洗4-5次;
接种和培养:处理后的外植体置于无菌滤纸上剥除外部幼叶,进一步分离幼嫩的茎尖,接种于诱导培养基进行培养。诱导培养基添加适当浓度的细胞分裂素和生长素。外植体接种后置于25℃,12h光照条件下培养,通常3-7d可以观察到茎尖外植体的萌发生长,可以获得无菌系。
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